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By A. Hughes, S. H. Hasan, G. W. Oertel, H. E. Voss, F. Bahner, F. Neumann, H. Steinbeck, K.-J. Gräf, J. Brotherton, H. J. Horn, R. K. Wagner

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K. WAGNER and A. : Steroid-Protein Interactions. Monographs on Endocrinology, Vol. 4. BerlinHeidelberg-New York: Springer 1971. , KENNEY, F. : RNA-synthesis in rat seminal vesicles: stimulation by testosterone. Science 144, 1346-1347 (1964). : Mechanism of hormone action. New York, London: Academic Press 1965. : Actions of vertebrate sex hormones. Ann. Rev. Physiol. 33, 31-81 (1971). : Biochemical actions of hormones, Vol. II, pp. 257-294. New York: Academic Press 1972. D. : The intranuclear metabolism of testosterone in the accessory organs of reproduction.

Expo 6, 131-139 (1972). II. HASAN With 10 Figures 1. Competitive Protein-Binding Method Recent developments in methodology, particularly the application of competitive protein-binding and radioimmunological assay techniques, have revolutionised research in various aspects of endocrinology . Work on disorders of androgen secretion has been hindered by the lack of sensitive and specific methods for measuring androgens. The methods reported before the introduction of the two newer methods mentioned above were tedious, difficult, expensive and in some instances unreliable.

8. Methods All the reported methods are invariably similar and differ only in the manner in which the radioactivity is separated into bound and free fractions, and in detailed methodology. The steps required for the analysis of blood samples for hormone determination by radioimmunoassay are the, same as those described earlier for competitive protein-binding methods (Fig. 2). 9. 1 ml buffer for correction of losses during extraction and purification. Freshly redistilled ether, in volumes of 4-10 ml according to the volume of samples used, is allowed to mix with the sample on vortex mixer for 30 sec.

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